সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরেসিস ব্যবহার করার জন্য আমরা গত সপ্তাহে বেশ কয়েকটি বিবেচ্য বিষয় শেয়ার করেছি, এবং আমরা আপনার রেফারেন্সের জন্য এই বিষয়টি আজ এখানে শেষ করব।
এর নির্বাচন বাফার ঘনত্ব
সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরসিসে ব্যবহৃত বাফার ঘনত্ব সাধারণত কাগজের ইলেক্ট্রোফোরসিসে ব্যবহৃত তুলনায় কম। সাধারণত ব্যবহৃত pH 8.6Bআরবিটাল বাফার সাধারণত 0.05 mol/L থেকে 0.09 mol/L এর মধ্যে বেছে নেওয়া হয়। ঘনত্ব নির্বাচন করার সময়, একটি প্রাথমিক সংকল্প করা হয়। উদাহরণস্বরূপ, ইলেক্ট্রোফোরেসিস চেম্বারের ইলেক্ট্রোডগুলির মধ্যে ঝিল্লির স্ট্রিপের দৈর্ঘ্য 8-10 সেমি হলে, ঝিল্লির দৈর্ঘ্যের প্রতি সেন্টিমিটারে 25V একটি ভোল্টেজ প্রয়োজন, এবং বর্তমান তীব্রতা ঝিল্লি প্রস্থের সেন্টিমিটার প্রতি 0.4-0.5 mA হওয়া উচিত। যদি এই মানগুলি ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় অর্জিত না হয় বা অতিক্রম না হয় তবে বাফারের ঘনত্ব বাড়ানো বা পাতলা করা উচিত।
একটি অত্যধিক কম বাফার ঘনত্বের ফলে ব্যান্ডগুলির দ্রুত চলাচল এবং ব্যান্ডের প্রস্থ বৃদ্ধি পাবে। অন্যদিকে, একটি অত্যধিক উচ্চ বাফার ঘনত্ব ব্যান্ড স্থানান্তরকে ধীর করে দেবে, যা নির্দিষ্ট বিচ্ছেদ ব্যান্ডগুলিকে আলাদা করা কঠিন করে তুলবে।
এটি লক্ষ করা উচিত যে সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরসিসে, কারেন্টের একটি উল্লেখযোগ্য অংশ নমুনার মাধ্যমে পরিচালিত হয়, যা যথেষ্ট পরিমাণে তাপ উৎপন্ন করে। কখনও কখনও, নির্বাচিত বাফার ঘনত্ব উপযুক্ত বলে বিবেচিত হতে পারে। যাইহোক, বর্ধিত পরিবেশগত তাপমাত্রার পরিস্থিতিতে বা উচ্চ ভোল্টেজ ব্যবহার করার সময়, তাপের কারণে জলের বাষ্পীভবন তীব্র হতে পারে, যার ফলে একটি অত্যধিক উচ্চ বাফার ঘনত্ব এবং এমনকি ঝিল্লি শুকিয়ে যেতে পারে।
নমুনা ভলিউম
সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরসিসে, নমুনার আয়তনের পরিমাণ বিভিন্ন কারণের দ্বারা নির্ধারিত হয়, যার মধ্যে রয়েছে ইলেক্ট্রোফোরেসিস অবস্থা, নমুনার বৈশিষ্ট্য, দাগ দেওয়ার পদ্ধতি এবং সনাক্তকরণ কৌশল। একটি সাধারণ নীতি হিসাবে, সনাক্তকরণ পদ্ধতি যত বেশি সংবেদনশীল, নমুনার পরিমাণ তত কম হতে পারে, যা বিচ্ছেদের জন্য সুবিধাজনক। নমুনার পরিমাণ অত্যধিক হলে, ইলেক্ট্রোফোরেটিক বিভাজনের ধরণ স্পষ্ট নাও হতে পারে এবং দাগ লাগাও সময়সাপেক্ষ হতে পারে। যাইহোক, ইলিউশন কলোরিমেট্রিক সনাক্তকরণ পদ্ধতি ব্যবহার করে আলাদা করা দাগযুক্ত ব্যান্ডগুলি পরিমাণগতভাবে বিশ্লেষণ করার সময়, নমুনার পরিমাণ খুব ছোট হওয়া উচিত নয়, কারণ এটি নির্দিষ্ট উপাদানগুলির জন্য কম শোষণের মান সৃষ্টি করতে পারে, যার ফলে তাদের বিষয়বস্তু গণনা করার ক্ষেত্রে উচ্চতর ত্রুটি হতে পারে। এই ধরনের ক্ষেত্রে, নমুনার পরিমাণ যথাযথভাবে বৃদ্ধি করা উচিত।
সাধারণত, নমুনা প্রয়োগ লাইনের প্রতিটি সেন্টিমিটারে যোগ করা নমুনা ভলিউম 0.1 থেকে 5 μL পর্যন্ত হয়, যা 5 থেকে 1000 μg নমুনার পরিমাণের সমতুল্য। উদাহরণস্বরূপ, রুটিন সিরাম প্রোটিন ইলেক্ট্রোফোরেসিস বিশ্লেষণে, অ্যাপ্লিকেশন লাইনের প্রতিটি সেন্টিমিটারে যোগ করা নমুনা ভলিউম সাধারণত 1 μL অতিক্রম করে না, 60 থেকে 80 μg প্রোটিনের সমতুল্য। যাইহোক, একই ইলেক্ট্রোফোরেসিস পদ্ধতি ব্যবহার করে লাইপোপ্রোটিন বা গ্লাইকোপ্রোটিন বিশ্লেষণ করার সময়, নমুনার পরিমাণ অনুরূপভাবে বৃদ্ধি করা প্রয়োজন।
উপসংহারে, প্রাথমিক পরীক্ষার একটি সিরিজের মাধ্যমে নির্দিষ্ট অবস্থার উপর ভিত্তি করে সবচেয়ে উপযুক্ত নমুনা ভলিউম নির্বাচন করা উচিত।
স্টেনিং সমাধান নির্বাচন
সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরসিসে আলাদা করা ব্যান্ডগুলি সাধারণত সনাক্ত করার আগে দাগযুক্ত হয়। বিভিন্ন নমুনা উপাদানের জন্য বিভিন্ন স্টেনিং পদ্ধতির প্রয়োজন হয় এবং সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য উপযুক্ত স্টেনিং পদ্ধতিগুলি ফিল্টার পেপারে সম্পূর্ণরূপে প্রযোজ্য নাও হতে পারে।
স্টেনিং সমাধান বেছে নেওয়ার জন্য তিনটি প্রধান নীতি রয়েছেসেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লি. প্রথমত,জল-দ্রবণীয় রঞ্জকগুলিকে অ্যালকোহল-দ্রবণীয় রঞ্জকগুলির চেয়ে অগ্রাধিকার দেওয়া উচিত যাতে পরবর্তীটির স্টেনিং দ্রবণের কারণে ঝিল্লির সংকোচন এবং বিকৃতি এড়াতে হয়। দাগ দেওয়ার পরে, জল দিয়ে ঝিল্লিটি ধুয়ে ফেলা এবং দাগের সময়কাল হ্রাস করা গুরুত্বপূর্ণ। অন্যথায়, ঝিল্লি কুঁচকানো বা সঙ্কুচিত হতে পারে, যা পরবর্তী সনাক্তকরণকে প্রভাবিত করবে।
দ্বিতীয়ত, নমুনার জন্য দৃঢ় স্টেনিং সম্বন্ধযুক্ত রং নির্বাচন করা বাঞ্ছনীয়। সিরাম প্রোটিনের সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরসিসে, অ্যামিনো ব্ল্যাক 10B সাধারণত ব্যবহৃত হয় কারণ বিভিন্ন সিরাম প্রোটিন উপাদানগুলির জন্য এর শক্তিশালী স্টেনিং সখ্যতা এবং এর স্থায়িত্ব।
তৃতীয়ত, নির্ভরযোগ্য মানের রং নির্বাচন করা উচিত। কিছু রঞ্জক, একই নাম থাকা সত্ত্বেও, অমেধ্য থাকতে পারে যা দাগের পরে একটি বিশেষভাবে অন্ধকার পটভূমিতে পরিণত হয়। এটি এমনকি মূলভাবে ভালভাবে পৃথক করা ব্যান্ডগুলিকেও অস্পষ্ট করতে পারে, তাদের পার্থক্য করা কঠিন করে তোলে।
অবশেষে, স্টেনিং সমাধান ঘনত্ব পছন্দ গুরুত্বপূর্ণ। তাত্ত্বিকভাবে, এটি মনে হতে পারে যে একটি উচ্চতর স্টেনিং দ্রবণ ঘনত্ব নমুনা উপাদানগুলির আরও পুঙ্খানুপুঙ্খ দাগ এবং আরও ভাল দাগের ফলাফলের দিকে পরিচালিত করবে। যাইহোক, এই ক্ষেত্রে না. নমুনা উপাদান এবং ছোপানো মধ্যে বাঁধাই সম্বন্ধ একটি নির্দিষ্ট সীমা আছে, যা স্টেনিং দ্রবণ ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে বৃদ্ধি পায় না। বিপরীতে, একটি অত্যধিক উচ্চ স্টেনিং দ্রবণ ঘনত্ব শুধুমাত্র রঞ্জক নষ্ট করে না কিন্তু একটি পরিষ্কার পটভূমি অর্জন করা কঠিন করে তোলে। অধিকন্তু, যখন রঙের তীব্রতা একটি নির্দিষ্ট সর্বোচ্চ মান ছুঁয়ে যায়, তখন রঞ্জকের শোষণ বক্ররেখা একটি রৈখিক সম্পর্ক অনুসরণ করে না, বিশেষ করে পরিমাণগত পরিমাপে৷ সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লি ইলেক্ট্রোফোরেসিস-এ, স্টেনিং দ্রবণের ঘনত্ব সাধারণত কাগজের ইলেক্ট্রোফোরসিসে ব্যবহৃত তুলনায় কম৷
বেইজিং লিউই বায়োটেকনোলজি সম্পর্কে জানতে বিস্তারিত's সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লিইলেক্ট্রোফোরসিস ট্যাঙ্ক এবং এর ইলেক্ট্রোফোরসিস অ্যাপ্লিকেশন, অনুগ্রহ করে এখানে যান:
lসেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন দ্বারা সিরাম প্রোটিন আলাদা করার জন্য পরীক্ষা
lসেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরেসিস
আপনার যদি আমাদের পণ্যগুলির জন্য কোন ক্রয় পরিকল্পনা থাকে, তাহলে অনুগ্রহ করে আমাদের সাথে যোগাযোগ করতে দ্বিধা করবেন না। আপনি আমাদের ইমেল বার্তা পাঠাতে পারেন[ইমেল সুরক্ষিত]বা[ইমেল সুরক্ষিত], অথবা অনুগ্রহ করে আমাদেরকে +86 15810650221 এ কল করুন বা Whatsapp +86 15810650221, অথবা Wechat: 15810650221 যোগ করুন।
তথ্যসূত্র:ইলেক্ট্রোফোরেসিস (দ্বিতীয় সংস্করণ) মিঃ লি
পোস্টের সময়: জুন-06-2023