সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরেসিস দ্বারা সিরাম প্রোটিন আলাদা করার জন্য পরীক্ষা

নীতি

সেলুলোজ অ্যাসিটেট ফিল্ম ইলেক্ট্রোফোরেসিস হল একটি ইলেক্ট্রোফোরসিস পদ্ধতি যা একটি সেলুলোজ অ্যাসিটেট ফিল্মকে সমর্থন হিসাবে ব্যবহার করে।যে ঘটনাটিতে চার্জযুক্ত কণাগুলি বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রের ক্রিয়ায় বিপরীত ইলেক্ট্রোডের দিকে চলে যায় তাকে ইলেক্ট্রোফোরেসিস বলে।যেহেতু প্রতিটি প্রোটিনের একটি নির্দিষ্ট আইসোইলেকট্রিক পয়েন্ট থাকে, যদি একটি প্রোটিনকে তার আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্টের চেয়ে কম pH সহ দ্রবণে স্থাপন করা হয়, তাহলে প্রোটিনটি ইতিবাচকভাবে চার্জ হবে এবং নেতিবাচক ইলেক্ট্রোডের দিকে চলে যাবে।বিপরীতভাবে, এটি ইতিবাচক মেরুতে চলে যায়।যেহেতু বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রে প্রোটিন অণুর গতি তাদের চার্জ, অণুর আকার এবং আকারের সাথে সম্পর্কিত, বিভিন্ন প্রোটিন ইলেক্ট্রোফোরেসিস দ্বারা পৃথক করা যেতে পারে।সিরামে বিভিন্ন ধরণের প্রোটিন রয়েছে, যার সবকটিরই পিএইচ7.5 বা তার কম আইসোইলেকট্রিক পয়েন্ট রয়েছে।ইলেক্ট্রোফোরেসিস চালানোর জন্য যখন সিরামকে pH 8.6 বাফারে রাখা হয়, তখন সমস্ত সিরাম প্রোটিন নেতিবাচকভাবে চার্জ করা হয় এবং বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রে ইতিবাচক দিকে চলে যায়।যেহেতু বিভিন্ন সিরাম প্রোটিনের একই pH-এ বিভিন্ন চার্জ থাকে, তাই আণবিক কণার আকার ভিন্ন হয়, এবং এইভাবে স্থানান্তরের গতি ভিন্ন হয় এবং তারা ইলেক্ট্রোফোরেসিস দ্বারা পৃথক হয়।সিরাম প্রোটিনের আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্ট এবং আণবিক ওজন নীচের সারণীতে দেখানো হয়েছে:

পরীক্ষাটি হল সাপোর্ট মিডিয়া হিসাবে সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন (abbr. CAM) দিয়ে রক্তের সিরামের বিভিন্ন প্রোটিন আলাদা করা।CAM হল এক ধরনের ফোমেড লোসeভাল ইউনিফর্ম সহ ফিল্ম, এবং বেধ 0.1 মিমি-1.5 মিমি, যার একটি নির্দিষ্ট জল শোষণ রয়েছে।

CAM ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য উপকরণ, যন্ত্র এবং বিকারক

নমুনা:সুস্থ মানুষের রক্তের সিরাম

যন্ত্র:পাওয়ার সাপ্লাই DYY-6C, ইলেক্ট্রোফোরেসিস ট্যাঙ্ক DYCP-38C, উচ্চতর নমুনা লোডিং WD-9404

বিকারক

1) সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লি 7X9cm

2) PH 8.6 বারবিটল বাফার দ্রবণ (আয়নিক শক্তি 0.05-0.09, এটি 0.06টি সময়।): 1,84 গ্রাম ডাইথাইল বারবিটুরিক অ্যাসিড নিন এবং তারপরে 1.03 গ্রাম ডাইথাইল সোডিয়াম পেন্টোবারবিটাল নিন, দ্রবীভূত করার জন্য তাপে কিছু পাতিত জল যোগ করুন এবং তৈরি করুন। 1000 মিলি পর্যন্ত;

3) দাগ: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, 100ml পাতিত জল যোগ করুন;

4) TBS/T বা PBS/T: 45ml 95% ইথানল, 5ml glacial acetic acid, 50ml পাতিত জল যোগ করুন;

5) ক্লিনিং সলিউশন: 70 মিলি অ্যানহাইড্রাস ইথানল, 30 মিলি গ্লাসিয়াল অ্যাসিটিক অ্যাসিড।

পরীক্ষা মেথোd

1) ঝিল্লি প্রস্তুত করুন: বারবিটল বাফার দ্রবণ 30min-8h মধ্যে ঝিল্লি নিমজ্জিত করুন, এবং এটি বের করে নিন, শোষক কাগজ দ্বারা অতিরিক্ত দ্রবণটি সরান।

2) নমুনা লোড হচ্ছে: ঝিল্লির রুক্ষ দিক এবং মসৃণ দিকটি আলাদা করুন এবং রুক্ষ দিকের উপরের প্রান্তে 1.5 সেমি দূরত্বে একটি লাইন চিহ্নিত করুন।রুক্ষ দিকে উচ্চতর নমুনা লোডিং টুল দ্বারা নমুনা লোড.দ্রষ্টব্য: নমুনাগুলি ঝিল্লির রুক্ষ দিকে লোড করা উচিত।সিরামের নমুনাগুলি সম্পূর্ণরূপে মেমব্রেনে প্রবেশ করার পরে, ঝিল্লিটি ঘুরিয়ে দিন, রুক্ষ দিকটি (নমুনা সহ) ট্যাঙ্কের দিকে মুখ করে রাখুন এবং নমুনা সহ শেষটি নেতিবাচক ইলেক্ট্রোডে স্থাপন করা হয়।

3) ইলেক্ট্রোফোরেসিস: পাওয়ার সাপ্লাই চালু করুন, 0.4～0.6m A/cm ঝিল্লি, চলমান সময় 30-45 মিনিট।ইলেক্ট্রোফোরসিস চালানোর পরে, পাওয়ার বন্ধ করুন।

4) দাগ এবং পরিষ্কার: ট্যাঙ্ক থেকে ঝিল্লি বের করে নিন এবং নিমজ্জিত করুনit 5 মিনিটের জন্য ছোপানো দ্রবণে, এবং তারপর পটভূমির রঙ পরিষ্কার না হওয়া পর্যন্ত 3-4 বার পরিষ্কার করার দ্রবণে এটি পরিষ্কার করুন।সিরাম প্রোটিনগুলি ব্যান্ডগুলিতে দেখানো উচিত, এবং সাধারণত পাঁচটি জোন থাকে, চিহ্নিত লাইনের উপরের প্রান্তে, অ্যালবুমিন, α1-গ্লোলিন, α2-গ্লোলিন, β-গ্লোলিন, γ-গ্লোলিন।

5) সংরক্ষণ: শুকনো ইলেক্ট্রোফোরেসিস রাখুনব্যান্ড10-15 মিনিটের জন্য পরিষ্কার দ্রবণে, এবং তারপর এটি বের করে একটি পরিষ্কার গ্লাসে আটকে দিন, এটি শুকানোর পরে, এটি একটি স্বচ্ছ ফিল্মে পরিণত হবেব্যান্ড.

পরীক্ষাফলাফল

সিরাম নমুনাগুলির বিচ্ছেদ প্রভাব ভাল, এবং কোনও ব্যান্ড টেলিং ঘটনা নেই।পরীক্ষার পদ্ধতি এবং পরীক্ষকের পদ্ধতির কারণে ফলাফলের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরিবর্তিত হয় এবং পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা বেশি।

উপসংহার

দ্রুত ক্লিনিকাল ইলেক্ট্রোফোরসিস সনাক্তকরণ সিস্টেম (ইলেক্ট্রোফোরেসিস ট্যাঙ্কDYCP-38C,পাওয়ার সাপ্লাইDYY-6C এবং উচ্চতর নমুনা লোডিং WD-9404) আমাদের দ্বারা উত্পাদিতকোম্পানি বেইজিং লিউই বায়োটেকনোলজি কোং লিমিটেডপরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে,এবংফলাফল প্রজননযোগ্য, সহজ এবং দ্রুত, জন্য উপযুক্তশিক্ষাদানগবেষণা.

বেইজিং লিউইবায়োটেকনোলজি কোং, লিমিটেড জীবন বিজ্ঞান শিল্পের জন্য ইলেক্ট্রোফোরেসিস পণ্য তৈরিতে বিশেষজ্ঞ, যাচীনে 50 বছরেরও বেশি ইতিহাস রয়েছে এবং সংস্থাটি সারা বিশ্বে স্থিতিশীল এবং উচ্চ-মানের পণ্য সরবরাহ করতে পারে।উন্নয়নের বছর ধরে, এটি আপনার পছন্দের যোগ্য!

আমরা এখন অংশীদারদের খুঁজছি, OEM ইলেক্ট্রোফোরসিস ট্যাঙ্ক এবং পরিবেশক উভয়কেই স্বাগত জানানো হয়।

আমাদের সম্পর্কে আরো তথ্যের জন্য, ইমেল দ্বারা আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন[ইমেল সুরক্ষিত]বা[ইমেল সুরক্ষিত].