হিমোগ্লোবিন ইলেক্ট্রোফোরেসিস পরীক্ষা

পরীক্ষার নীতি

হিমোগ্লোবিন ইলেক্ট্রোফোরেসিস বিভিন্ন স্বাভাবিক এবং অস্বাভাবিক হিমোগ্লোবিন সনাক্ত এবং নিশ্চিত করা লক্ষ্য করে।

বিভিন্ন ধরণের হিমোগ্লোবিনের বিভিন্ন চার্জ এবং আইসোইলেকট্রিক পয়েন্টের কারণে, একটি নির্দিষ্ট পিএইচ বাফার দ্রবণে, যখন হিমোগ্লোবিনের আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্ট বাফার দ্রবণের pH থেকে কম হয়, তখন হিমোগ্লোবিন একটি ঋণাত্মক চার্জ বহন করে এবং ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় অ্যানোডের দিকে স্থানান্তরিত হয়। বিপরীতভাবে, ধনাত্মক চার্জ সহ হিমোগ্লোবিন ক্যাথোডের দিকে চলে যায়।

একটি নির্দিষ্ট ভোল্টেজের অধীনে এবং একটি নির্দিষ্ট ইলেক্ট্রোফোরেসিস সময়ের পরে, বিভিন্ন চার্জ এবং আণবিক ওজন সহ হিমোগ্লোবিনগুলি বিভিন্ন স্থানান্তর দিক এবং গতি প্রদর্শন করে। এটি স্বতন্ত্র অঞ্চলগুলিকে পৃথক করার অনুমতি দেয় এবং বিভিন্ন হিমোগ্লোবিন পরিমাপ করার জন্য এই অঞ্চলগুলিতে পরবর্তী কালরিমেট্রিক বা ইলেক্ট্রোফোরেটিক স্ক্যানিং বিশ্লেষণ করা যেতে পারে। সর্বাধিক ব্যবহৃত পদ্ধতি হল pH 8.6 সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরেসিস।

সাইটোপ্লাজমের মধ্যে, গ্লাইকোজেন বা পলিস্যাকারাইড পদার্থ (যেমন মিউকোপলিস্যাকারাইড, মিউকোপ্রোটিন, গ্লাইকোপ্রোটিন, গ্লাইকোলিপিড ইত্যাদি) উপস্থিত ইথিলিন গ্লাইকল গ্রুপ (CHOH-CHOH) পর্যায়ক্রমিক অ্যাসিড দ্বারা জারিত হয় এবং অ্যালডিহাইড গ্রুপে (CHOH-CHOH) রূপান্তরিত হয়। এই অ্যালডিহাইড গ্রুপগুলি বর্ণহীন বেগুনি-লাল শিফ রিএজেন্টের সাথে একত্রিত হয়, একটি বেগুনি-লাল রঞ্জক তৈরি করে যা কোষে যেখানে পলিস্যাকারাইড থাকে সেখানে জমা হয়। এই প্রতিক্রিয়াটি পর্যায়ক্রমিক অ্যাসিড-শিফ (PAS) স্টেনিং হিসাবে পরিচিত, যাকে আগে গ্লাইকোজেন স্টেনিং বলা হত।

পরীক্ষা পদ্ধতি

উপকরণ:সেলুলোজ অ্যাসিটেটমেমব্রেন, ইলেক্ট্রোফোরসিস যন্ত্রপাতি(DYCP-38C এবং পাওয়ার সাপ্লাই DYY-6C), উচ্চতর নমুনা লোডিং টুল(পাইপেট), স্পেকট্রোফোটোমিটার, কালোরিমেট্রিক কিউভেটস, বাফার

বাফার:

(1) pH 8.6 TEB বাফার: ওজন 10.29 গ্রাম Tris, 0.6 গ্রাম EDTA, 3.2 গ্রাম বোরিক অ্যাসিড, এবং 1000 মিলি পাতিত জল যোগ করুন।

(2) বোরেট বাফার: ওজন 6.87 গ্রাম বোরাক্স এবং 5.56 গ্রাম বোরিক অ্যাসিড, এবং 1000 মিলি পাতিত জল যোগ করুন।

পদ্ধতি:

Pহিমোগ্লোবিন সলিউশন মেরামত

হিপারিন বা সোডিয়াম সাইট্রেটযুক্ত 3 মিলি রক্ত ​​অ্যান্টিকোয়ুল্যান্ট হিসাবে নিন। 2000 rpm-এ 10 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং প্লাজমা বাদ দিন। শারীরবৃত্তীয় স্যালাইন (প্রতিবার 750 rpm, 5 মিনিট সেন্ট্রিফিউগেশন) দিয়ে তিনবার লাল রক্তকণিকা ধুয়ে ফেলুন। 2200 rpm-এ 10 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং সুপারনাট্যান্ট বাদ দিন। সমান পরিমাণে পাতিত জল যোগ করুন, তারপরে কার্বন টেট্রাক্লোরাইডের পরিমাণের 0.5 গুণ যোগ করুন। 5 মিনিটের জন্য জোরে জোরে ঝাঁকান, এবং তারপরে পরবর্তী ব্যবহারের জন্য উপরের Hb দ্রবণটি সংগ্রহ করতে 10 মিনিটের জন্য 2200 rpm-এ সেন্ট্রিফিউজ করুন।

ঝিল্লি ভিজিয়ে রাখা

সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লিটি 3 সেমি × 8 সেমি পরিমাপের স্ট্রিপগুলিতে কাটুন। সম্পূর্ণরূপে পরিপূর্ণ না হওয়া পর্যন্ত এগুলিকে pH 8.6 TEB বাফারে ভিজিয়ে রাখুন, তারপর ফিল্টার পেপার দিয়ে মুছে ফেলুন এবং শুকিয়ে দিন।

স্পটিং

প্রান্ত থেকে প্রায় 1.5 সেন্টিমিটার দূরে সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লিতে (রুক্ষ দিক) উল্লম্বভাবে হিমোগ্লোবিন দ্রবণের 10 μl স্পট করতে একটি পাইপেট ব্যবহার করুন।

ইলেক্ট্রোফোরেসিস

ইলেক্ট্রোফোরেসিস চেম্বারে বোরেট বাফার দ্রবণ ঢালা। চেম্বারের ক্যাথোড প্রান্তে দাগযুক্ত পাশে সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লি রাখুন। 30 মিনিটের জন্য 200 V এ চালান।

ইলুশন

HbA এবং HbA2 জোনগুলি কেটে নিন, আলাদা টেস্ট টিউবে রাখুন এবং যথাক্রমে 15 মিলি এবং 3 মিলি পাতিত জল যোগ করুন। হিমোগ্লোবিন সম্পূর্ণরূপে নির্গত করার জন্য আলতো করে ঝাঁকান, তারপর মিশ্রিত করুন.

বর্ণমিতি

ইলুশন দ্রবণের জন্য পাতিত জল ব্যবহার করে শোষণকে শূন্য করুন এবং শোষণকে 415 nm এ পরিমাপ করুন।

হিসাব

HbA2(%) = HbA2 টিউবের শোষণ / (HbA টিউবের শোষণ × 5 + HbA2 টিউবের শোষণ) × 100%

পরীক্ষামূলক ফলাফল গণনা

পিএইচ 8.6 টিইবি বাফার সেলুলোজ অ্যাসিটেট ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য রেফারেন্স রেঞ্জ: HbA > 95%, HbA2 1%-3.1%

নোট

ইলেক্ট্রোফোরেসিস সময় খুব বেশি হওয়া উচিত নয়। ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লি শুকিয়ে যাওয়া উচিত নয়। HbA এবং HbA2 পরিষ্কারভাবে আলাদা হয়ে গেলে ইলেক্ট্রোফোরসিস বন্ধ করুন। দীর্ঘায়িত ইলেক্ট্রোফোরেসিস ব্যান্ডের বিস্তার এবং ঝাপসা হতে পারে।

অত্যধিক নমুনা ব্যবহার এড়িয়ে চলুন. অত্যধিক হিমোগ্লোবিন তরল ব্যান্ড বিচ্ছিন্নতা বা অপর্যাপ্ত দাগের কারণ হতে পারে, ফলস্বরূপ মিথ্যাভাবে উচ্চতর HbA মাত্রা।

প্রোটিনের সাথে সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লির দূষণ রোধ করুন।

স্রোত খুব বেশি হওয়া উচিত নয়; অন্যথায়, হিমোগ্লোবিন ব্যান্ড আলাদা নাও হতে পারে।

সর্বদা স্বাভাবিক ব্যক্তির নমুনা এবং নিয়ন্ত্রণ হিসাবে প্রয়োজনীয় পরিচিত অস্বাভাবিক হিমোগ্লোবিন অন্তর্ভুক্ত করুন।

বেইজিং লিউই বায়োটেকনোলজি হিমোগ্লোবিন ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য পেশাদার ইলেক্ট্রোফোরেসিস ট্যাঙ্ক তৈরি করে যা মডেলDYCP-38Cসেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরেসিস ট্যাঙ্ক, এবং সেলুলোজ অ্যাসিটেট মেমব্রেন ইলেক্ট্রোফোরেসিস ট্যাঙ্কের জন্য ইলেক্ট্রোফোরেসিস পাওয়ার সাপ্লাইয়ের দুটি মডেল পাওয়া যায়DYY-2CএবংDYY-6Cপাওয়ার সাপ্লাই

এদিকে, বেইজিং লিউই বায়োটেকনোলজি গ্রাহকদের জন্য সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লি সরবরাহ করে এবং সেলুলোজ অ্যাসিটেট ঝিল্লির আকার কাস্টমাইজ করা যেতে পারে। নমুনা এবং আরও তথ্যের জন্য আমাদের জিজ্ঞাসা করতে স্বাগতম।

বেইজিং লিউই ব্র্যান্ডের চীনে 50 বছরেরও বেশি ইতিহাস রয়েছে এবং সংস্থাটি সারা বিশ্বে স্থিতিশীল এবং উচ্চ-মানের পণ্য সরবরাহ করতে পারে। উন্নয়নের বছর ধরে, এটি আপনার পছন্দের যোগ্য!

আমরা এখন অংশীদারদের খুঁজছি, OEM ইলেক্ট্রোফোরসিস ট্যাঙ্ক এবং পরিবেশক উভয়কেই স্বাগত জানানো হয়।

আপনার যদি আমাদের পণ্যগুলির জন্য কোন ক্রয় পরিকল্পনা থাকে, তাহলে অনুগ্রহ করে আমাদের সাথে যোগাযোগ করতে দ্বিধা করবেন না। আপনি আমাদের ইমেল বার্তা পাঠাতে পারেন[ইমেল সুরক্ষিত]বা[ইমেল সুরক্ষিত], অথবা অনুগ্রহ করে আমাদেরকে +86 15810650221 এ কল করুন বা Whatsapp +86 15810650221, অথবা Wechat: 15810650221 যোগ করুন