অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (1) এর প্রাথমিক কৌশল

1. শ্রেণীবিভাগ

জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস উল্লম্ব প্রকারে বিভক্ত (কলাম জেল এবং স্ল্যাব জেল সহ) এবং অনুভূমিক প্রকারে (প্রধানত স্ল্যাব জেল) (চিত্র 6-18)। সাধারণত, উল্লম্ব বিচ্ছেদ অনুভূমিক থেকে সামান্য উচ্চতর, কিন্তু অনুভূমিক জেল প্রস্তুতির অন্তত চারটি সুবিধা রয়েছে: সম্পূর্ণ জেলের নীচে সমর্থন রয়েছে, কম ঘনত্বের অ্যাগারোস ব্যবহারের অনুমতি দেয়; বিভিন্ন স্পেসিফিকেশনের অ্যাগারোজ জেল প্লেট প্রস্তুত করা সম্ভব; জেল প্রস্তুতি এবং নমুনা লোডিং আরো সুবিধাজনক; ইলেক্ট্রোফোরেসিস চেম্বারটি নির্মাণ করা সহজ এবং সাশ্রয়ী। যেহেতু ইলেক্ট্রোফোরেসিস বাফারের পৃষ্ঠের প্রায় 1 মিমি নীচে সম্পূর্ণরূপে নিমজ্জিত অ্যাগারোজ জেল প্লেট দিয়ে অনুভূমিক ইলেক্ট্রোফোরেসিস সঞ্চালিত হয়, তাই একে নিমজ্জিত ইলেক্ট্রোফোরেসিসও বলা হয়।

图片2

অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য ইলেক্ট্রোফোরেসিস ট্যাঙ্ক DYCP-31DN

2.বাফার সিস্টেম

নিউক্লিক অ্যাসিড বিচ্ছেদে, বেশিরভাগ সিস্টেম অবিচ্ছিন্ন সিস্টেম গ্রহণ করে। সাধারণত ব্যবহৃত ইলেক্ট্রোফোরেসিস বাফারগুলির মধ্যে রয়েছে TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L বোরিক অ্যাসিড, 0.0024mol/L EDTA) বাফার এবং THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L সোডিয়াম অ্যাসিটেট, 0.0018mol/L EDTA) বাফার। এই বাফারগুলি সাধারণত 10x স্টক সলিউশন হিসাবে প্রস্তুত করা হয় এবং ব্যবহারের সময় প্রয়োজনীয় ঘনত্বে মিশ্রিত করা হয়। অ্যাগারোজ জেলে রৈখিক এবং বৃত্তাকার ডিএনএর স্থানান্তর হার ব্যবহৃত বাফারের সাথে পরিবর্তিত হয়। বাফারে, রৈখিক ডিএনএর স্থানান্তর হার বৃত্তাকার ডিএনএর চেয়ে বেশি, যখন টিবিই বাফারে, বিপরীতটি সত্য।

3

3. Agarose জেল প্রস্তুতি

(1) অনুভূমিক অ্যাগারোজ জেল তৈরি

(a) 1x ইলেক্ট্রোফোরেসিস বাফার ব্যবহার করে অ্যাগারোজ জেলের প্রয়োজনীয় ঘনত্ব প্রস্তুত করুন।

(b) একটি ফুটন্ত জলের স্নানে, একটি চৌম্বক আলোড়নকারী বা একটি মাইক্রোওয়েভে সম্পূর্ণ দ্রবীভূত করার জন্য আগারোজকে গরম করুন। অ্যাগারোজ দ্রবণকে 55°C তাপমাত্রায় ঠান্ডা করুন এবং 0.5 μg/ml এর চূড়ান্ত ঘনত্বে ইথিডিয়াম ব্রোমাইড (EB) ডাই যোগ করুন।

(c) অল্প পরিমাণে অ্যাগারোজ জেল দিয়ে কাচের বা এক্রাইলিক প্লেটের কিনারা সিল করুন, একটি চিরুনি যোগ করুন এবং চিরুনি দাঁতগুলিকে প্লেটের উপরে প্রায় 0.5~1.0 মিমি রাখুন।

(d) গলিত অ্যাগারোজ জেলের দ্রবণ ক্রমাগত গ্লাস বা এক্রাইলিক প্লেটের ছাঁচে ঢেলে দিন (বেধ নির্ভর করে ডিএনএ নমুনার আয়তনের উপর), বাতাসের বুদবুদের প্রবর্তন এড়িয়ে। এটি ঘরের তাপমাত্রায় প্রাকৃতিকভাবে শক্ত হতে দিন।

(ঙ) সম্পূর্ণ শক্ত হওয়ার পরে সাবধানে চিরুনিটি সরিয়ে ফেলুন। জেল ট্যাঙ্কে উপযুক্ত পরিমাণে ইলেক্ট্রোফোরেসিস বাফার যোগ করুন, নিশ্চিত করুন যে জেল প্লেটটি ইলেক্ট্রোফোরেসিস বাফারের পৃষ্ঠের প্রায় 1 মিমি নীচে ডুবে আছে।

(2) উল্লম্ব Agarose জেল প্রস্তুতি

(ক) ইথানল দিয়ে ধুয়ে গ্লাস প্লেট থেকে গ্রীস বা অবশিষ্টাংশ সরান।

(b) সামনে এবং পিছনের বাঁধগুলির মধ্যে স্পেসার প্লেটগুলি রাখুন, স্পেসার প্লেটের প্রান্তগুলি সামনের এবং পিছনের বাঁধগুলির সাথে সারিবদ্ধ করুন এবং সেগুলিকে ক্ল্যাম্প দিয়ে সুরক্ষিত করুন৷

(c) জেল ঢালাই চেম্বারের নীচে 1 সেমি উঁচু অ্যাগারোজ প্লাগ তৈরি করতে স্পেসার প্লেটের প্রান্তের মধ্যে 1x বাফারে 2% অ্যাগারোজ যোগ করুন।

(d) গলিত অ্যাগারোজ জেলটি পছন্দসই ঘনত্বে, 1x বাফারে প্রস্তুত, শীর্ষের নীচে 1 সেমি পর্যন্ত জেল চেম্বারে ঢেলে দিন।

(ঙ) চিরুনিটি ঢোকান, চিরুনি দাঁতের নিচে বাতাসের বুদবুদ আটকানো এড়িয়ে চলুন। কখনও কখনও, আগারোজ জেল ঠান্ডা করার সময় চিরুনি দাঁতে বলিরেখা দেখা দিতে পারে; এই ধরনের ক্ষেত্রে, এটিকে শক্ত করার জন্য উপরের অংশে কিছু গলিত আগারোজ যোগ করুন।

(f) চিরুনিটি সরান। লোডিং স্লটে বাফার লিকেজ রোধ করতে, অ্যাগারোজ জেল প্লেট এবং ইলেক্ট্রোফোরেসিস চেম্বারের মধ্যে সংযোগটি 2% অ্যাগারোজ দিয়ে সিল করুন এবং প্রয়োজনীয় পরিমাণ বাফার যোগ করুন।

(g) জেল চেম্বারে 1x ইলেক্ট্রোফোরেসিস বাফার যোগ করুন।

(h) সাবধানে বাফারের নীচে আগারোজ জেলে ডিএনএ নমুনাগুলি লোড করুন।

3

অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস সম্পর্কে প্রাথমিক জ্ঞান সম্পর্কে আরও তথ্য, আমরা আগামী সপ্তাহে ভাগ করব। এই তথ্য আপনার পরীক্ষার সহায়ক হতে চান.

বেইজিং লিউই বায়োটেকনোলজি কোং লিমিটেড (লিউই বায়োটেকনোলজি) আমাদের নিজস্ব পেশাদার প্রযুক্তিগত দল এবং গবেষণা ও উন্নয়ন কেন্দ্রের সাথে 50 বছরেরও বেশি সময় ধরে ইলেক্ট্রোফোরেসিস যন্ত্র তৈরিতে বিশেষীকরণ করেছে। আমরা ডিজাইন থেকে পরিদর্শন, এবং গুদাম, সেইসাথে বিপণন সমর্থন নির্ভরযোগ্য এবং সম্পূর্ণ উত্পাদন লাইন আছে. আমাদের প্রধান পণ্যগুলি হল ইলেক্ট্রোফোরেসিস সেল (ট্যাঙ্ক/চেম্বার), ইলেক্ট্রোফোরেসিস পাওয়ার সাপ্লাই, ব্লু এলইডি ট্রান্সিলুমিনেটর, ইউভি ট্রান্সিলুমিনেটর, জেল ইমেজ অ্যান্ড অ্যানালাইসিস সিস্টেম ইত্যাদি।

আমরা এখন অংশীদারদের খুঁজছি, OEM ইলেক্ট্রোফোরসিস ট্যাঙ্ক এবং পরিবেশক উভয়কেই স্বাগত জানানো হয়।

আপনার যদি আমাদের পণ্যগুলির জন্য কোন ক্রয় পরিকল্পনা থাকে, তাহলে অনুগ্রহ করে আমাদের সাথে যোগাযোগ করতে দ্বিধা করবেন না। আপনি আমাদের ইমেল বার্তা পাঠাতে পারেন[ইমেল সুরক্ষিত]বা[ইমেল সুরক্ষিত], অথবা অনুগ্রহ করে আমাদেরকে +86 15810650221 এ কল করুন বা Whatsapp +86 15810650221, অথবা Wechat: 15810650221 যোগ করুন।

Whatsapp বা WeChat এ যোগ করতে অনুগ্রহ করে QR কোড স্ক্যান করুন।

2


পোস্টের সময়: ডিসেম্বর-০৭-২০২৩